Diagnostico de Laboratorio

Hay cuatro especies de malaria que comunmente infectan al hombre, el P. falciparum, el P. vivax, el P. malariae y el P. ovale.  El más importante de éstos es el P. falciparum ya que puede ser rápidamente fatal.  El P. vivax es la especie que se ve con más frecuencia.  La P. malariae está presente en África, Sur América y en una área de Nueva Guinea.  El P. ovale se encuentra principalmente en África tropical.

Recientemente han salido al mercado una serie de nuevas técnicas rápidas tipo "dipstick" para el diagnóstico de malaria.  Estos equipos incluyen ICT-Malaria, Pf, OptiMAL y Determine.  Estas pruebas se basan en el principio de la detección de la proteina rica en histidina-2 (HRP-2) o la detección de la enzima dehidrogenasa de lactato específica para parásito presente en infecciones por P. falcíparum.  Existe ya un número de informes que indican especificidades cercanas al 100%.  Algunos de estos métodos de "dipstick" también se están utilizando para el tamizaje de otras formas de malaria pero hasta ahora los resultados no han sido tan impresionante.

En este laboratorio hemos encontrado que estos "kits"de investigación, son muy útiles como pruebas de confirmación, especialmente cuando hay dificultad en identificar escasas formas de anillo en frotis de sangre.  Se ha determinado que son útiles de noche o en los fines de semana cuando seguramente trabaja personal menos experimentado.  No obstante quisiéramos hacer enfasis que el examen de la gota gruesa y del frotis (ver abajo) siguen siendo los métodos de referencia.

El examen de una película gruesa de sangre debe ser el primer paso. Si se ven parásitos, entonces se examina el frotis fino para confirmar la especie.  La muestra de sangre se recoge preferiblemente cuando la temperatura del paciente este subiendo.

Preparación de la gota gruesa y frotis fino de sangre:

Gota gruesa:- Coloque una gota de sangre en el centro de una lamina limpia de microscopio.  Con la esquina de una segunda lamina riegue la gota hasta que adquiera el tamano de una una moneda de cinco centavos.  El espesor debe ser tal que permita ver apenas la impresión del periodico a traves de la lamina.  Los frotis finos se hacen de manera estándar.  Permita que los preparados se sequen, pero no se vaya del laborarorio si hay mozcas.  De lo contrario éstas se pueden comer el preparado.

Cuando las películas esten secas, fije y colorée el frotis fino de la manera convencional pero cuide que el pH del colorante este ligeramente alcalino, se recomienda (pH 7.2).  Un colorante ácido puede que no muestre los parásitos.  La gota gruesa se coloréa mejor usando colorante de Giemsa diluido (1/20).  Utilize una jarra de coplin para que el frotis se mantenga en posición vertical.  Esto permite que cualquier escombro caiga al fondo de la jarra.  No fije la muestra antes de colorearse.  Coloree por unos 30 minutos, lávese suavemente y deje que se seque.  Si lo tiene, utilize un control positivo.

Bajo el microscopio examine la gota gruesa primero.  Use el lente de inmersion en aceite o el lente de alto aumento para determinars si los parásitos están presentes.  Tome nota del numero de plaquetas y de leucocitos en el paciente.  La malaria usualmente se asocia a un numero de leucocitos normales o reducidos.  Leucocitosis solo ocurre en casos terminales.  El números de plaquetas se reduce en forma moderada o severa en aproximadamente un 80% de los pacientes con malaria.  Los parásitos pueden aparecer distorsionados si el paciente ha sido tratado o ha recibido profilaxis inadecuada.

Las infecciones mixtas no son infrecuentes.

Las ilustraciones muestran las características de las cuatro especies.

Puntos a considerar en el diagnóstico

1. Las células rojas no se agrandan.
2. Los anillos lucen finos y delicados.
3. Puede haber varios en una célula.
4. Algunos anillos pueden tener dos puntos de cromatina.
5. Presencia de formas marginales.
6. Es infrecuente ver formas en desarrollo en frotis de sangre periférica.
7. Los gametocitos tienen un aspecto de salchicha característico.  Sin embargo, generalmente no aparecen en la sangre antes de las primeras cuatro semanas de la infección.
8. Los puntos de Maurer pueden estar presentes.

Puntos a conciderar en el diagnóstico

1. Las células rojas que contienen parásitos usualmente se agrandan.
2. Los puntos de Schuffner están con frecuencia presentes en las células rojas tal como se muestra arriba.
3. Las formas de anillo maduras tienden a ser grandes y gruesas.
4. Las formas en desarrollo están presentes con frecuencia.

Puntos a conciderar en el diagnóstico

1. Las formas de anillo pueden tener un aspecto algo cuadrado.
2. Las formas en banda son características de esta especie.
3. Los esquizontes maduros pueden tener un aspecto típico de margarita con hasta diez merozoites.
4. Las células rojas no se agrandan.
5. El punto de cromatina puede estar en la superficie interna del anillo.

Puntos a conciderar en el diagnóstico

1. Encontrado solamente en África.
2. Células rojas agrandadas.
3. Formas de cometa son comunes (ver arriba y a la derecha).
4. Anillos grandes y gruesos.
5. Los puntos de Schuffner, cuando aparecen, pueden ser prominentes.
6. Los esquizontes maduros son similares a los de P. malariae pero más grandes y más gruesos.